Objectives: Bone-decalsification is still a time consuming and laboring process in histopathology laboratories. In this study, we have aimed
a comparision of decalsification degrees and staining properties of compact bone tissue decalcificated by formic acid, Biodec-R, and
Decalcifier II as decalcification agents.
Materials and Methodology: A total of 6 healthy male rats (200-220 g) were used in this study. Rats were decapitated by cervical
dislocation. Femurs were removed and 0.5 cm long pieces from these femurs were fixed in 10% formaldehyde for 36 hours. Subsequently,
the bone-tissues were stored in decalcification fluids at room temperature for six days. The bone-tissue samples were processed by routine
tissue procedures. They were further processed for light microscopic examination and stained with hematoxylin-eosin, Gomori’s trichrome,
and Periodic acid-Schiff. We have examined the bone sections under a Leica DFC280 light microscope and Leica Q Win Image Analysis
System (Leica Micros Imaging Solutions Ltd.; Cambridge, U.K).
Results: When all three decalcification agents were applied for equal time periods and at the same experimental design, it was observed
that formic acid is more effectible for the preservation of natural structure of the bone tissue and on the quality of the staining properties. It
was observed that Biodec R and Decalcifier II are similar to each other in terms of staining properties and preservation of structural details
of cells and tissue.
Conclusion: Formic acid decalcification is adviced for histologic staining and for a higher qualitiy of microscopic view during histological
examination of compact bone tissues.
Amaç: Kemik dekalsifikasyonu histopatoloji laboratuvarlarında hala zahmetli ve zaman alıcı bir süreçtir. Bu çalışmada, kemik dekalsifikasyonu
için kullanılan formik asit, Biodec-R ve Decalcifier II dekalsifikasyon ajanları ile kompakt kemik dokularının dekalsifikasyon derecesi ve
boyanma özelliklerinin karşılaştırılması amaçlandı.
Gereç ve Yöntem: Çalışmada toplam altı adet sağlıklı erkek sıçan (200-220 g) kullanıldı. Sıçanlar servikal dislokasyonla dekapite edildi ve
her iki femurları çıkarıldı. Femurlardan alınan 0.5 cm uzunluğundaki parçalar %10’luk formaldehitte 36 saat süreyle tespit edildi. Daha sonra
kemik dokuları dekalsifikasyon sıvılarında altı gün oda ısısında bekletildi. Dekalsifikasyonun ardından kemik doku örnekleri rutin doku takip
işlemlerinden geçirilerek ışık mikroskobik inceleme için hazırlandı. Lamlar üzerine alınan 6 μm kalınlığındaki kesitlere hematoxylin eosin,
Gomori’s trichrome ve Periodic acid-Schiff boyamaları yapıldı. Kesitler Leica DFC 280 ışık mikroskobu ve Leica Q Win görüntü analiz
sisteminde (Leica Micros Imaging Solutions Ltd.; Cambridge, U.K) incelendi.
Bulgular: Her üç dekalsifikasyon ajanı aynı süre, aynı deney dizaynıyla uygulandığında; formik asitin kemik dokunun doğal histolojik yapısını
en iyi koruduğunu ve boyanma özelliklerinin belirgin şekilde daha kaliteli olduğu gözlendi. Biodec-R ve Decalcifier II’nin hücre ve doku
detaylarının korunması ve boyanma özellikleri açısından birbirine benzer olduğu saptandı.
Sonuç: Kompakt kemik dokunun histolojik incelenmesinde formik asit dekalsifikasyonu, histolojik boyanma ve mikroskopik görüntü kalitesi
açısından tercih edilebilir.
