Bacillus thuringiensis cry IVA VE cry IVD genlerinin birlikte Baculovirus ekspresyon vektör sisteminde ifadesi
Küçük Resim Yok
Tarih
2000
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bu çalışmada, Bacillus thuringiensis subsp. israelensis'e ait insektisidal kristal proteinlerini kodlayan crylVA ve crylVD genlerinin baculovirüs ekspresyon vektör sisteminde ekspresyonları gerçekleştirildi. crylVA ve crylVD genlerinin kodlayan DNA bölgeleri elde edilerek çoğaltıldı. Bu genleri taşıyan DNA fragmanları birlikte Autographa californica nuklear polihedrozis virüsü (AcNPV, Baculovirüs) transfer plazmıdindeki polihedrin (polh) promotorunun önüne klonlandı. Transfer plazmidi yaban tip AcNPV DNA'sı ile birlikte Spodoptera frugiperda böcek hücre kültürüne transfekte edildi. Hücre içerisinde oluşan crylVA ve crylVD genlerine sahip rekombınant AcNPV'ler "plak" yöntemiyle seçilerek saflaştırıldı. Bu genlerin kodladığı proteinler poliakrilamid jel elektroforez yöntemiyle tespit edildi.
Açıklama
31.08.2000 00:00
